Der Tanz der Moleküle

Wie Verdunstung und Verunreinigung Ihr Chromatogramm auf den Kopf stellen

Die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) und die Ultra-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (UHPLC) sind essentielle Werkzeuge in der analytischen Chemie, die tiefe Einblicke in die Struktur und Zusammensetzung chemischer Verbindungen gewähren.

Doch selbst in den sorgfältigsten Laboren kann eine  unsichtbare „Choreographie“ aus Verdunstung und Verschmutzungen der Lösungsmittel entstehen, die Präzision der Ergebnisse beeinträchtigen, und das Chromatogramm in einen Wirbelsturm verwandeln. Das kann so frustrierend werden, dass man die gesamte Analytik „an die Wand klatschen“ möchte.

 

Verschmutzungen des Lösungsmittels

In der präzisen Welt der HPLC / UHPLC haben selbst geringfügige Verunreinigungen der Lösungsmittel kritische Auswirkungen. Das Chromatogramm, das als visuelle Darstellung der Trennung von Verbindungen dient, kann durch unerwünschte Peaks („Geisterpeaks“), Baseline-Instabilität und Verzerrungen gestört werden. Diese Unregelmäßigkeiten machen eine genaue Quantifizierung und Identifizierung von Verbindungen äußerst schwierig.

In der Chromatographie sprechen wir nicht umsonst von einer sauberen Trennung. Besonders wenn die Peaks, auf die Sie es abgesehen haben, nah beieinander liegen oder sich überlagern (also eben nicht sauber getrennt sind), stört jede noch so kleine Verunreinigung – und der Schmutzfink wütet im Chromatogramm.

 

 

SCAT Belüftungsventile sorgen mit Ihrem Luftfilter dafür, dass nur saubere Luft in den Lösungsmittelbehälter gelangt. Wem das noch nicht ausreicht, kann zusätzlich eigene Filter verwenden, die sich einfach am integrierten Luer-Lock-Anschluss befestigen lassen. Das können Partikelfilter mit bestimmter Porengröße, Feuchtigkeits- oder spezielle Biofilter sein, je nach individueller Anwendung.

Verdunstung von Lösungsmittelgemischen

Verdunstung ist ein heimlicher Akteur, der das Bühnenbild verändert. Während der Analyse können flüchtige Bestandteile schneller verdunsten als andere, was zu Ungleichgewichten in der gelösten Probe führt. Dies kann zu unscharfen Peaks, verringerter Auflösung und sogar zu irreversiblen Schäden an der Säule führen. So gerät die molekulare Harmonie durcheinander, die in einem Chromatogramm angestrebt wird. Genauigkeit und Reproduzierbarkeit der Analyse leiden.

Eine optimale Lösung ist der hermetische Einschluss des Laufmittelvorrats, damit alles dort bleibt, wo es soll: in der Vorratsflasche. Damit bei der Entnahme kein Unterdruck entsteht, gleichen SCAT Safety Caps Druckdifferenzen durch ihr integriertes Belüftungsventil aus. Frische Luft kann rein, aber keine Dämpfe raus – so herrscht wieder Harmonie im Foyer des HPLC-Theaters.

 

Sichere Lösungsmittel als Teil guter HPLC-Methodenentwicklung

Bei der Entwicklung einer HPLC-Methode gibt es vieles zu bedenken: die geeignete Säule, das richtige Lösungsmittel, Temperatur, Druck, Detektionswelle und andere Einflussgrößen sind zweifellos von Bedeutung. Doch eine saubere Lösungsmittelversorgung ohne Verdunstung ist ebenso wichtig wie diese Parameter. Selbst die sorgfältigste Methode kann durch verunreinigte Lösungsmittel in einen falschen Takt geraten. Unvorhersehbare und unzuverlässige Ergebnisse sind die Folgen. Je präziser die Analytik, desto gravierender wirkt sich ein einzelner Schmutzpartikel aus.

Verborgene Herausforderungen: Weitere Probleme durch Verunreinigung oder Verdunstung

Abseits der offensichtlichen Auswirkungen auf das Chromatogramm und die Analyseergebnisse können Verunreinigungen und Verdunstung subtile, aber bedeutsame Probleme verursachen. Zum Beispiel kann die Stabilität der Säule gefährdet sein, was zu kürzerer Lebensdauer und damit zu höheren Kosten führt. Jeder weiß, was eine gute Säule kostet, wenn man nicht gerade eine Micky-Maus-Analytik fährt.

Zudem kann die Reproduzierbarkeit der Methode beeinträchtigt werden, was die Übertragbarkeit zwischen verschiedenen Laboratorien oder Geräten erschwert. Letztendlich bedrohen Verdunstung und Verunreinigung die Genauigkeit und Zuverlässigkeit von HPLC / UHPLC-Analysen wie eine unsichtbare Hand.

Wer das Zusammenspiel sauberer, stabiler Lösungsmittel mit den anderen Parametern einer zuverlässigen Analytik versteht, kann sich in der faszinierenden Welt der HPLC / UHPLC sicher bewegen. Nur durch sorgfältige Beachtung dieser „unsichtbaren“ Faktoren können die wissenschaftlichen Tänzer im Labor einen präzisen Tango aufs Parkett legen – und die zuverlässigen Ergebnisse erreichen, die sie suchen.

Weitere Informationen

Dieser Blogbeitrag entstand mit freundlicher Unterstützung der Firma SCAT. Quelle aller Bilder: SCAT

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